厭氧手套箱(Anaerobie glove box)即厭氧培養(yǎng)箱,是迄今為止國際上公認的培養(yǎng)厭氧菌佳儀
器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手
套,可通過手套在箱內進行操作,故名。箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著。
欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(10%H2, 5%CO2, 85%N2)達
到厭氧狀態(tài),然后手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門。箱內保持厭氧狀
態(tài),也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節(jié)溫度,本身
是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細
菌的大量培養(yǎng)研究,大量培養(yǎng)基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、
充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動調節(jié)。
(一)結構
共分為:厭氧室、傳輸艙、裸手袖套操作孔、氣路及電路控制系統四大部分。
1、厭氧室
內腔機械強制對流與內腔正壓,實現恒溫、控濕、除氧、生物脫毒四方面狀態(tài)穩(wěn)定均一,并且快
速恢復,操作培養(yǎng)同室進行。
2、傳輸艙:
采用緊湊式筒狀設計,實現單人單手輕松轉移樣品。
3、裸手袖套操作孔:
無需進行抽真空/充氮置換過程,雙手可直進直出內腔厭氧。
4、控制系統:
全方位實時狀態(tài)自檢報警功能,確保設備正常運行。(二)操作室厭氧環(huán)境形成
1)按使用要求放置好必要的配件和器具、并向操作室內放入兩個無毒塑料袋。
2)混合氣瓶、氮氣瓶輸入壓力調整,調節(jié)減壓閥,使輸入壓力為0.1Mpa
3) 打開設備后配,電源開關后,按控制牌上的總電源鍵,使設備通電。
4)操作室放入1000g鈀粒(密封),由冷凝系統除濕,并放入厭氧指示劑。
5)關緊取樣室內外門,并抽真空校驗。(按控制面牌上真空泵鍵,按一下開,再按一下關)
6)操作室內第一次置換(氮氣置換):
(1)先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一個插入塑料袋。
(2)接通氮氣進氣路,打開操作室氮氣控制閥,使兩只塑料袋充足氮氣后,關閉電磁閥,然
后扎緊袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
(4)把塑料袋內氮氣漸漸的放于操作室內,至全部防除。
7)操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次沖氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣
閥關閉排氣。
8)操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10%
CO2/15%)
(1)調換氣路打開操作室混合氣閥進氣,沖氣時取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關閉
排氣。
(2)混合氣充滿塑料袋后,關閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,使混合氣經過穩(wěn)流器、流量
計、調整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。8)操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%)
(1)調換氣路打開操作室混合氣閥進氣,沖氣時取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關閉排氣。
(2)混合氣充滿塑料袋后,關閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,使混合氣經過穩(wěn)流器、流量計、調
整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。
(3)把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
(4)通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)
9)操作室內打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,并在厭氧指示條反應區(qū)上滴一點
潔凈水, 1-2小時后,觀察其變色情況,反應部分深藍色變?yōu)闇\藍為操作室內達到厭氧環(huán)境。
10)紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理,滅菌時間自定。
(三)菌種的置入和培養(yǎng)
1)檢查取樣室內門并關緊之。
2)打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外們。
3)取樣室充氮置換三次過程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后打開取樣室氧氣閥進
氣,使指針回復零位,關掉閥。取樣室充氮置換三次過程結束。
4)如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
5)取樣室外門開啟、關緊后,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗。
6)厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件
(1)每天在操作室內放入美蘭指示條觀察,如不能正常就必須重新換氣。
(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結合通過催化吸收,保證了室內
厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3) .連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱
內,干燥2-3小時可使其復原)(2)熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉熔蠟。
8)操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內的溫度可任意選擇和控制。
(四)注意事項
1.儀表盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方。
2.開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。
3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內達到絕對厭氧環(huán)境后放入。
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。(超過12小時則根據
需要把培養(yǎng)物取出另作處理)。
5.經常注意氣路有無漏氣現象
6.調換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體
7.真空泵按要求使用,定期檢查加油。
8.停止使用,關閉總電源鍵,及設備后部的電源開關
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